LABORATÓRIOS CLÍNICOS
 
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Detecção de Enterobacteriaceae (urina, secreções vaginais e uretrais):o:p>

Isolamento

CROMOCEN AGN ou ECCS

Usa a metodologia de substratos tradicionais (lactose)

Usa a tecnologia de substratos cromogênico (x-GAL) e fluorogênico (MUG)

Preparo do meio de cultura (Agar de MacConkey)

Tomada de amostras

Tomada de amostras

Inoculação por estrias ou 5 mL para urocultivo

Inoculação por estrias ou 5 mL para urocultivo

Incubação a 35 °C por 24 horas

Incubação a 35 °C por 24 horas

Leitura das placas – luz UV (para ECCS)

Leitura das placas

 

Diferenciação de coliformes

Diferenciação de E. coli, outros coliformes, Salmonella, Pseudomonas

Provas bioquímicas para a identificação

Descarte das placas

Incubação a 35 °C por 24-48 horas

Tempo total de ensaio e preparação dos meios - 24 horas

Descarte das placas

 

Lavagem das placas

 

Secagem das placas

 

Tempo total de ensaio e preparação dos meios - 96 horas

 

 


Detecção de Salmonella sp. (coprocultivo):

 

Isolamento

CROMOCEN SC

Usa a metodologia tradicional de enriquecimento seletivo e  isolamento nos meios seletivos diferenciais

Usa a metodologia tradicional de enriquecimento seletivo e isolamento com identificação em CromoCen SC baseado na fermentação de um álcool  combinado com  substrato cromogênico para a diferenciação de coliformes

Preparo dos meios de cultura (RV, XLD, S.S., LIA, URE)

Preparo dos meios de cultura (RV)

Tomada de amostras

Tomada de amostras

Enriquecimento em RV

Enriquecimento em RV

Incubação a 42 °C por 24 horas

Incubação a 42 °C por 24 horas

Isolamento seletivo em XLD ou S.S

Isolamento em CromoCen SC

Incubação a 35 °C por 24 horas

Incubação a 35 °C por 24 horas

Leitura das placas

Leitura das placas e identificação

Colônias suspeitas - provas bioquímicas (LIA, Urea)

Colônias suspeitas - sorologia

Incubação a 35 °C por 24 horas

Descarte das placas

Colônias presuntivas - sorologia

Tempo total de ensaio e preparação dos meios - 48 horas

Descarte das placas

Limitações: Não se detecta S. typhi, nem paratyphi

Lavagem das placas

 

Secagem das placas

 

Tempo total de ensaio e preparação dos meios - 96 horas

 

Limitações: Não se detecta S. typhi, nem paratyphi

 

 


Detecção de Pseudomonas aeruginosa (secreções orais, oculares e de queimaduras):

Isolamento

CROMOCEN AGN

Usa a metodologia tradicional de detecção dos pigmentos

Usa a metodologia tradicional de detecção dos pigmentos combinados com substratos cromogênicos para a diferenciação de enterobactérias

Meio altamente seletivo (inibitório)

Meio pouco seletivo (inibição de bactérias Gram-positivas)

Preparo do meio de cultura (Cetrimida con NA)

Tomada de amostras

Tomada de amostras

Isolamento em AGN

Isolamento seletivo em ágar Cetrimida com ácido nalidíxico (NA)

Incubação a 37 °C por 24 horas

Incubação a  37 °C por 24-48 horas

Leitura das placas – luz UV

Leitura das placas– luz UV

Descarte das placas

Colônias suspeitas – Provas bioquímicas

Tempo total de ensaio e preparação dos meios - 24 horas

Incubação a 35 °C por 24 horas

 

Descarte das placas

 

Lavagem das placas

 

Secagem das placas

 

Tempo total de ensaio e preparação dos meios - 72 horas

 

 


Detecção de E. coli O157:H7 (coprocultivo):

 

Isolamento

CROMOCEN ECCS

Usa a metodologia tradicional de isolamento nos meios seletivos diferenciais

Usa a metodologia tradicional de  isolamento com identificação no CromoCen ECCS baseado na fermentação de sorbitol combinado com substratos cromogênico e fluorogênico para a diferenciação de outros coliformes e uma prova rápida complementar

Preparo do meio de cultura (SMAC + TP)

Tomada de amostras

Tomada de amostras

Isolamento em CromoCen ECCS

Isolamento seletivo em SMAC + TP

Incubação a 35 °C por 18-24 horas

Incubação a 35 °C por 18-24 horas

Leitura das placas e identificação

Leitura das placas

Colônias suspeitas – ressuspender a colônia em 0,2 mL de sol. salina e realizar a prova rápida de GAD.

Colônias suspeitas – Indol ou provas bioquímicas.

Incubação a 35 °C por 1- 4 horas

Incubação a 35 °C por 24 horas

GAD (+) - sorologia

E. coli - sorologia

Tempo total de ensaio e preparação dos meios - 28 horas

Descarte das placas

 

Lavagem das placas

 

Secagem das placas

 

Tempo total de ensaio e preparação dos meios - 72 horas

 

Limitações: o TP é muito seletivo o que diminui a recuperação de E. coli O157:H7

 

 



 

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